小鼠肾小球内皮细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货
时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理。
一.小鼠肾小球内皮细胞贴壁细胞
客户接收到细胞,用 75%的酒精消毒(建议配制 75%酒精的水是灭菌过的)培养
瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍
照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张)。
显微镜观察细胞,当细胞融汇 80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在 37 度
培养箱预温 1-2h 后再做处理。如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基
继续培养。
严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器
中(建议换新的培养基培养细胞)。
用 PBS2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的 0.05%胰酶-EDTA 消化细胞,显微镜
下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
1000rpm,5min 离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2 培养。
二.小鼠肾小球内皮细胞悬浮细胞
1.接收到细胞,用 75%的酒精消毒(建议配制 75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶
外部。
2.肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数
拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张)。
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